Основное достоинство их в постоянстве электродвижущей силы.
Кислотный аккумулятор имеет несколько свинцовых пластин, покрытых окисью свинца (РЬО), которые припаяны к свинцовому бруску (анод) и вставлены между подобными же свинцовыми пластинами, припаянными к другому бруску (катод)., Каждый брусок соединен с клеммой, выведенной наружу. Пластины погружены в стеклянный сосуд с электролитом, которым служит разведенная химически чистая серная кислота удельного веса 1,15—1,20,(22—28% H2S04).Загрузка. Пожалуйста, подождите...
При параллельном соединении соединяют одноименные полюсы элементов или аккумуляторов. Это увеличивает силу тока (ампераж), так как внутреннее сопротивление батареи уменьшается во столько раз, сколько взято в нее элементов или аккумуляторов. Напряжение же батареи равно напряжению отдельного элемента или аккумулятора.
В тех случаях, когда надо уменьшить напряжение элемента или аккумулятора, применяют реохорд, образующий добавочную цепь.
При уменьшении расстояния (вкручивают винт в) частота перерывов увеличивается, при увеличении (выкручивают винт в) частота уменьшается. Частоту можно варьировать в пределах 15—80 в течение одной секунды. На вторичной катушке имеется также пара клемм для отведения индукционного тока от вторичной обмотки к электродам (на рис. 21 они не изображены).
Индукционный санный аппарат позволяет отводить к электродам различной силы ток.
Кроме того, в первичную цепь обоих аппаратов следует вводить источники тока одинаковой электродвижущей силы, иначе сила индукционного тока будет различной.
2. При пользовании двумя индукционными аппаратами их надо расположить под прямым углом друг к другу. Это предупредит появление индукционного тока в неработающей катушке при работе другой,
3. Не следует допускать разряда индукционных токов через обмотку вторичной катушки при разомкнутой вторичной цепи: от него страдает изоляция витков и аппарат выходит из строя.
К клеммам подводят провода для включения прибора в первичную цепь индукционного аппарата.
При качании маятника, приводимого в движение часовым механизмом, штифты на концах коромысла то опускаются в чашечки с ртутью, то поднимаются из них, замыкая и размыкая ток в первичной цепи. Изменение ритма достигается передвижением хомутика по маятнику. Возможные ритмы обозначены на шкале, прикрепленной к корпусу метронома.
Теперь они вновь притягиваются к электромагниту, и весь процесс повторяется. В результате происходит постоянное и равномерное замыкание и размыкание тока в цепи.
Электромагнитный камертон применяется как прерыватель, а также в целях графической регистрации малых отрезков времени. Для этого на одной из его ножек укрепляют перо (4), которое приводят в соприкосновение с закопченной поверхностью движущегося барабана.
Через 10—15 минут последний, выключают; на электродах к этому времени должен появиться ровный черный налет. Накоротко замыкают на 3 минуты проводником проволочки и угольную палочку. Затем электроды вытягивают из сосуда и ополаскивают дистиллированной . водой.. Хранят их в темном месте.
2. Часто приходится рисовать схемы расположения' электрических приборов, которыми пользуются для раздражения живых тканей или отведения'от них электрических потенциалов.
Умножив концентрацию последнего на коэффициент разведения исследуемого раствора, определяют количество содержащегося в нем окрашенного вещества.
Колориметрировать можно лишь в том случае, если цвет растворов качественно одинаков, но различен по интенсивности. При определении количества гемоглобина в крови его превращают при помощи соляной кислоты в солянокислый ге--матин и сравнивают цвет полученного раствора с цветом стандартного эталона солянокислого гематина.
3. Захватывают пинцетом задний конец грудины и, слегка приподняв кверху, перерезают его ножницами поперек. Через образовавшееся отверстие вводят внутрь грудной полости браншу ножниц, которыми перерезают грудную стенку так, как это делали при удалении кожи.
Образуется треугольной формы костно-мышечнЫй лоскут, обращенный основанием к нижней челюсти. Его удаляют, перерезая ключицы, мягкие ткани у нижней челюсти и связки, идущие от внутренней поверхности грудной стенки к сердечной сумке.
4. Сопоставляют движения рычажка с фазами сокращения желудочка (систоле соответствует поднятие, а диастоле — опускание рычажка).
5. Определяют количество сокращений сердца в течение 1 минуты. Если каждая отметка на линии времени делается через 1 секунду, то на кардиограмме подсчитывают количество вершин, лежащих против 60 отметок.
Приборы, материалы и объекты исследования. Тарелка, воронка на 0,5 л, стеклянная трубка длиной в 1 ж и диаметром в 0,5 см, короткая П-образная стеклянная трубка, две стеклянные трубки диаметром в 1 см, согнутые под углом в 40—45°, три штатива, два кольца и два держателя к штативам, резиновые трубки, пробки, подкрашенная метиленовой синькой вода, ножницы, скальпель, пинцет, иглодержатель, хирургическая игла, тонкий шпагат, рычажок Э н г е л ь м а н а, кимограф, нитки, сердце быка или крупной собаки (не жирное).
Для передвижения закопченной полоски бумаги служат два валика, которые приводятся в движение часовым механизмом,установленным на приборе. Две скобки направляют движение бумаги. Для завода и пуска часового механизма на его корпусе находятся винт и рычажок.
Степень напряжения пружины, несущей пелот, регулируется винтом, на оси которого установлен эксцентрик.
Для укрепления сфигмографа на руке служит тесьма с зажимом.
Подготовка опыта. 1. Берут аппарат для перфузии. Заполняют один сосуд Мариотта D и соответствующую бюретку раствором Рингера, а второй мариоттов сосуд и бюретку—раствором Рингера с адреналином (1 : 10 ООО ООО или 1 : 5 000 000). Устанавливают одинаковый уровень растворов в бюретках.
2. Соединяют аортальную канюлю с аппаратом для перфузии.
Ход опыта. 1. Промывают в течение 10— 15 минут сосудистый препарат раствором Рингера из первой бюретки до получения постоянного числа падающих за минуту капель.
Ртутный насос Сечено-в а, водоструйный насос, пипетка с загнутым концом, свеча, спички, 10% раствор КОН, пирогаллол, октиловый спирт, дефибринированная кровь собаки.
Задача. Кислород и углекислота находятся в крови в растворенном или в химически связанном состоянии: кислород в эритроцитах, а углекислота главным образом в плазме крови. Извлечение газов из крови и определение их количества по Сеченову производится при помощи сконструированного им ртутного насоса, основанного на принципе возобновляемой то* ричеллиевой пустоты.
9. Встряхивают аппарат в течение 4—5 минут для того, чтобы смешать раствор красной кровяной соли с кровью. После этого сосудики вновь погружают в водяную баню, устраняя влияние колебаний температуры на ход реакции в них.
10. Определяют положение уровней масла в трубках манометра после вытеснения 02 из крови красной кровяной солью.
11. Находят разность в положении уровней масла в трубках манометра до и после вытеснения 02 из крови.
Собака с хроническими фистулами слюнных желез.
Задача. Слюноотделение изучают по способу И. П. Павлова на собаке, имеющей хронические фистулы протоков околоушной, подчелюстной и подъязычной желез.
Протоки желез отпрепаровывают от окружающих тканей и вместе с кусочками слизистой оболочки рта выводят через сквозной прокол щеки (для околоушной железы) или дна полости рта( для подчелюстной и подъязычной желез) наружу.
Задачей работы является запись голодных движений желудка собаки при помощи метода воздушной передачи.
Подготовка опыта. Регистрацию голодных движений производят посредством воздушной передачи. Для этого в полость желудка голодной собаки вводят через фистульную трубку резиновый баллон (палец от резиновой перчатки), который соединяют стеклянной и резиновой трубками с капсулой Марея (рис. 92). По ходу резиновой трубки ставят тройник, на сво-
бодный конец которого надевают резиновую же трубку с зажимом Мора.
Для этого через каждые 15 секунд от начала кормления исследуют содержимое желудка на лакмус. Время от начала кормления до появления первой кислой капли и будет определять скрытый период желудочного сокоотделения (5—10 минут).
4. Продолжают опыт мнимого кормления, подкладывая в чашку время от времени свежее мясо. Выделяемый из желудка сок собирают в подставленный под фистульную трубку сосуд. Через 4—5 часов измеряют количество выделившегося сока.
Полученную смесь помещают в гильзу.
3. В цилиндр калориметра наливают 2000 мл воды комнатной температуры.
4. Укрепляют гильзу А эластичными пружинками рр пластинки В.
5. В трубку п вводят электроды, которые своей проволочной петлей должны касаться смеси в гильзе.
6. Закрыв кран Е, накрывают гильзу колоколом Д.
7. Опускают снаряд в цилиндр с водой так, чтобы вырезка а на пластинке В пришлась к той стороне крышки, на которой .
Количество KCI в граммах находят по атомному весу (К—40, С1—35,5 и О—16), который умножают на 59, так как каждый грамм при своем растворении поглощает 59 малых калорий.
14. Выражают количество выделившегося тепла от сгорания 1 г молочного сахара в больших калориях.
Практические указания. 1, Перемешивать смесь из бертолетовой соли, перекиси марганца и пищевого вещества надо на бумаге, пользуясь стеклянной палочкой, но не в фарфоровой ступке, так как может произойти взрыв.
4. По средней линии внутренней поверхности бедра, отступя на 2—3 см от паха, делают продольный разрез кожи (5—6 см). Раздвигают крючками края разреза в стороны и находят в глубине его сосудисто-нервный пучок. Выделяют из пучка бедренные артерию и вену (см. рисунок 4).
5. Бедренную артерию перевязывают лигатурой в дисталь-мом отделе. На 4—5 см проксимальнее перевязки накладывают на артерию клемм-пинцет или зажим Пеана.
Показавшуюся кровь устраняют марлевыми тампонами. Надламывают кость пинцетом и отворачивают кпереди. После удаления хрящевых образований обнаруживаются гипофиз, серый бугор и зрительная хиазма.
Гипофиз захватывают пинцетом, приподнимают кверху и отрезают у основания. Костный лоскут ставят на место, на слизистую накладывают непрерывый шов.
Если гипофиз удален полностью, то через несколько часов кожа у лягушки значительно светлеет.
Приготовление препаратов
Приборы, материалы и объекты исследования. Тарелка, ножницы, большие и глазные, два пинцета, зонд, стеклянный крючок, нитки, полотенце, 0,6% раствор NaCl, лягушки.
Задача. При изучении нервно-мышечной физиологии опыты проводят главным образом на органах, изолированных из организма лягушки: икроножном мышечном препарате, нервно-мышечном препарате и реоскопической лапке.
Использование нервов и мышц лягушки объясняется легкостью их выделения.
gastrocnemius) подводят нитку, которой его перевязывают, а затем дистальнее этого места перерезают. Подняв за нитку мышцу, отпрепаровывают ее от окружающих тканей.
Берцовую кость ниже, а бедро выше коленного сустава перерезают. С костей удаляют лишние мягкие ткани.
Нижняя часть бедренной кости служит для укрепления мышцы в зажиме миографа. Ахиллово же сухожилие при помощи лигатуры привязывают к регистрирующему рычажку миографа.
Отмечают расстояние между катушками, при котором мышца начинает сокращаться в ответ на прямое и непрямое раздражение.
Первым обнаруживается ответ мышцы (сокращение ее) на размыкание индукционного тока (порог раздражения для раз-мыкательного индукционного удара).
4. Продолжая сдвигать катушки, находят расстояние между ними, при котором мышца в ответ на прямое и непрямое раздражение сокращается и при замыкании тока в цепи (порог раздражения для замыкательного индукционного удара).
5. Определяют длительность латентных периодов первого и второго одиночного мышечного сокращения (см. работу 58). Вычисляют разность между ними.
6. Пользуясь измерительной линейкой и циркулем, определяют в сантиметрах длину нерва между электродами.
7. Вычисляют скорость проведения возбуждения по нерву.
Работа 68. Токи покоя
Приборы, материалы и объекты исследования. Гальванический пинцет или циркуль, цинковые неполяризующиеся электроды, подвесные электроды, держатели на шарнирах для неполяризующихся электродов, штатив, зеркальный (или стрелочный) гальванометр, вольтметр, два ключа Дюбуа для короткого замыкания, ключ-рубильник, реохорд, индукционный аппарат, коммутатор (виппа Поля) с крестом, аккумулятор, элемент Гренэ, провода, эбонитовая пластинка, ножницы большие и глазные, два пинцета, зонд, стеклянный крючок, вата, тарелка, раствор, Рингера, лягушка.
Задача. В XVIII веке Л. Гальвани открыл электрические явления в животном организме. В доказательство их он привел два эксперимента.
Первый — сокращение мышц лягушки от прикосновения лапки к двум соединенным между собой металлам — имеет лишь исторический интерес. Объяснение, данное этому явлению Гальвани, неверно. Сокращение мышц обусловлено не электрическими токами, возникающими в организме, а разностью потенциалов на концах двух металлов.
В момент контакта нерва с последними наблюдают сокращение мышц реоскопической лапки.
Обнаружение токов покоя при помощи гальванометра. 1. Приготовляют препарат икроножной мышцы (см. работу 55). У сухожильного конца ее перерезают поперек и кладут на эбо^
нитовую пластинку.
2. Устанавливают неполяризующиеся электроды так, чтобы один из них был на поверхности мышцы, а другой на ее разрезе. Через коммутатор соединяют Их с зеркальным или стрелочным гальванометром, который накоротко замыкают ключом ( рис.
Работа 69. Опыт вторичного сокращения
Приборы, материалы и объекты исследования. Электроды, вмонтированные в эбонитовую пластинку, аккумулятор, индукционный аппарат, ключ, провода, ножницы, большие и малые, два пинцета, зонд, стеклянный крючок, нитки, тарелка, вата, 0,6% раствор NaCl, три лягушки.
Задача. При возбуждении мышцы, т. е. при переходе ее в деятельное состояние, в ней (так же как и в нерве) возникает электрический ток.
4. Замыкают постоянный ток и во время прохождения его через нерв определяют порог индукционного размыкательного удара у катода. Обнаруживают понижение порога (катэлектро-тон).
5. Выключают постоянный ток и наблюдают восстановление исходного порога размыкательного индукционного раздражения.
6. При помощи коммутатора меняют направление тока. Ближайший к мышце электрод становится анодом (возникает восходящий tok"J.
Приготовляют два нервно-мышечных препарата (седалищный нерв и икроножная мышца).
2. Проксимальные концы обоих нервов помещают на электроды, которые соединяют со вторичной обмоткой индукционного аппарата (рис. 125). Концы бедренных костей укрепляют мышечными клеммами так, чтобы мышцы свободно свисали.
3. Дистальный конец одного из нервов помещают на неполяризующиеся электроды, к которым ответвляют через реохорд постоянный ток от аккумулятора.
Через несколько минут наблюдают полную неподвижность животного: происходит паралич всей мускулатуры, кроме мышц правой задней конечности.
4. Отпрепаровывают седалищный нерв левой конечности. Обнажают икроножную мышцу, разрезав над ней продольно кожу.
5. Собирают обычную установку для раздражения прерывистым индукционным током.
Ход опыта. 1. Раздражают током кожу спины, живота и передних конечностей.
5. Находят пороговое раздражение для получения тетанического сокращения мышцы. Для этого:
а) ставят качалку коммутатора в такое положение, чтобы ток от вторичной катушки мог пойти к электродам 7;
б) отодвигают вторичную катушку индукционного аппарата от первичной на 50 см, накоротко замкнув ключом вторичную катушку;
в) замыкают ключ в первичной цепи;
г) пускают в ход барабан кимографа;
размыкают ключ вторичной катушки; изменяя расстояние между катушками, находят пороговое раздражение, которое вызывает тетанус; под кривой тетануса отмечают пороговую силу, т.
1 Кожу и булавку предварительно дезинфицируют спиртом.
3. Берут в рот 3—5% раствор NaCl. Через некоторое время ощущение соленого уменьшается или полностью прекращается.
4. Подносят к носу резиновую трубку. Ощущение запаха резины постепенно притупляется или полностью прекращается.
Работа 96. Офтальмоскопия
Приборы, материалы и объекты исследования. Офтальмоскоп, двояковыпуклая линза в 1 диоптрию, матовая электрическая лампа, электрическая лампа, окрашенная в зеленый цвет, экран.
4. Укрепляют булавку на расстоянии 2—3 см от экрана. Испытуемый видит ее раздвоенной. Закрыв правое отверстие в экране, испытуемый наблюдает исчезновение левого изображения, и, наоборот, закрыв левое отверстие,— исчезновение правого изображения.
5. Определяют ближайшую точку ясного видения. Для этого булавку постепенно отодвигают от экрана до тех пор, пока она не перестанет раздваиваться. Измеряют расстояние в сантиметpax от экрана до булавки.
На рисунках 1.1—1.5 показан ряд пенициллинов, полученных из 6-АПК сотрудниками фирмы «Бичэм» в 1959—1970 гг. Кроме того, здесь указаны их наиболее интересные антибактериальные свойства.
В последующие периоды после 1970 г. был достигнут дальнейший прогресс, который хотя и не был столь значительным, как первоначальные успехи, тем не менее имел свое значение. Здесь следует упомянуть о разработке так называемых резервных форм некоторых наиболее активных пенициллинов.
Дальнейшее подразделение их, очевидно, произойдет после рентгеноструктурного анализа большей части препаратов и определения их точной структуры.
Известно, что в процессе культивирования большинство продуцентов антибиотиков синтезирует группу химически близких соединений (например, микроорганизм — продуцент гентамицина синтезирует 17 антибиотиков), среди которых химической характеристике бывают подвергнуты, как правило, лишь те из них, которые вырабатываются в больших количествах [6].
Одновременно с разработкой программы исследования новых микробных метаболитов, обладающих антибиотическими свойствами, следует развивать программу получения полусинтетических антибиотиков. Как было указано выше, мы уже разработали тысячи пенициллинов, цефалоспоринов, тетрациклинов и рифамици-нов, но только около 0,1 % из всех этих препаратов оказались несколько лучше старых лекарств, что способствовало их внедрению в клиническую практику.
В большинстве случаев стратегия разработки полусинтетических антибиотиков складывается из изучения механизма действия исходного антибиотика, его фармакологии и химии. Главным условием успеха является получение положительных фармакологических данных;
3) в настоящее время в лабораториях, организованных по решению правительств, разрабатывается меньше проектов, чем это было 20 лет назад. Несмотря на общую озабоченность об обеспечении пищевыми продуктами возросшего народонаселения, большинство правительств резко снизило расходы на исследования и разработку антибиотиков, которые могли бы оказаться очень эффективными при хранении потребительских продуктов и уменьшить, их порчу в период между сбором урожая и поступлением к потребителю.
Но как учесть действие отдельных препаратов в составе парных или множественных комбинаций?
Степень бактерицидного действия может быть оценена так, как это предложили Джевитс и др. [136]. Мы можем подтвердить, что в случае синергизма справедливы три положения, высказанные Дэвисом и Севагом [71]:
1) концентрация комбинированного препарата должна быть ниже ингибирующей концентрации каждого из входящих в него веществ;
2) концентрация каждого препарата в комбинации никогда не должна быть выше ингибирующей концентрации каждого из них в отдельности;
3) в присутствии комбинации разных веществ развитие выживших микроорганизмов должно происходить независимо от того, содержат они или нет резистентную популяцию (и причем не за короткое время).
Однако в большинстве случаев такие микроорганизмы возникают спонтанно и исчезают после прекращения применения антибиотиков. Проще говоря, микроорганизмы, несущие R-плазмиду, редко надолго остаются в организме хозяина. Однако при достаточном времени и селективном давлении, которые отмечаются при длительном непрерывном контакте с антибиотиками, такие штаммы все же можно обнаружить. Тем не менее установленный группой Ричмонда факт, что примерно 30 % Рч+-штаммов Е.
Рассматривая современное состояние вопроса, по-видимому, следует сделать очень краткий обзор результатов применения парных препаратов, иногда называемых как синергид-ные комбинации, которые в действительности являются дополняющими друг друга и использовались в различных целях.
Простейшей и наверняка наименее синергидной является комплементация двух антибиотиков, которая в половинной от МИК каждого препарата концентрации оказывает такое же действие, как ингибирующая концентрация каждого из них по отдельности.
Однако в специфической активности каждого из них имеются некоторые различия. Триметоприм преимущественно активен против Streptococcus faecalis, тогда как сульфонамид более активен против патогенных нейссерий, в то же время ни один из препаратов не обладает достаточной активностью против Pseudomonas. Другими словами, их совместный спектр антибактериальной активности охватывает очень широкий ряд микроорганизмов, включая обычные пиогенные грамположитель-ные кокки, Haemophilias influenzae и большое число знтеробакте-рий.
Под действием циклосерина происходит последовательная блокировка следующих друг за другом стадий .метаболического пути, во многом напоминающая блокаду сульфонамидом и триметопримом метаболического пути синтеза фолатов.
Другой пример внутримолекулярного синергизма связан с деп-сипептидами. Это исключительно интересная группа природных соединений, к которым относятся вещества с неустановленной биологической активностью, причем некоторые из них исключительно токсичны, а также большая группа антибиотиков.
Условия взаимодействия в лаборатории, где осуществляется подбор относительных концентраций препаратов, условия испытания и испытуемые штаммы могут не совпадать с клиническими условиями.
Хорошим примером в этом смысле является комбинация пенициллина и фузидата натрия, широко используемая в терапии. В .лаборатории можно легко показать, что фузидат натрия и пенициллины являются в основном антагонистами.
На ранних этапах данной работы отбор антагонистов проводили, используя Lactobacillus casai в качестве тест-организма [56], так как было известно, что потребность L. casai в неиденти-фицированном в то время витамине тесно связана с синтезом пуринов, и тимина [69, 86, 87, 90]. Кроме того, было известно, что потребность в этом витамине может быть удовлетворена за счет этих веществ, поэтому указанный тест оказался пригодным для изучения потенциальных антиметаболитов.
coli на среде без тимина [28]. В культурах. Е. coli и Staph, aureus после контакта с ТМП появляются крупные вакуолизированные дегенеративные клетки.
Будет ли данное сочетание препаратов бактерицидным in vivo, неизвестно. Ясно одно, что это сочетание высокоэффективно при лечении многих инфекций, а обладает ли оно бактерицидным действием, это не главное для антибактериального препарата при его использовании с лечебными целями.
При других инфекциях имеется больше оснований применять комбинацию этих препаратов, поскольку концентрации лекарств на участке заражения обычно равны или даже меньше величины МИК для каждого из них, взятого в отдельности.
Однако, по данным Шнейдера и др. [82], применение одного ТМП в дозе 400—800 мг в день (при обычной дозе в комбинации с СМЗ 320 мг в день) оказалось очень эффективным в случае инфекций, вызванных Proteus, у 31 пациента с неопластическим заболеванием.
coli (штамм ECSA1, клинический изолят) в присутствии ТМП и СМЗ в двух турбиди-метрических модельных системах. Первая из них осуществлялась с помощью 12-канального прибора для регистрации роста бактерий [10], который позволял исследовать влияние ТМП и СМЗ на Е. coli при таких же условиях роста, как и при стандартном определении МИК. Во второй системе концентрированную суспензию Е. coli подвергали действию препаратов в модели in vitro, предназначенной для имитирования гидрокинетических процессов мочевого пузыря [5, 11].
6.1). Регистрация роста указанным способом позволила выявить заметный антибактериальный эффект при концентрациях СМЗ ниже его минимальной ингиби-рующей, причем отмечено восстановление роста культуры за ночь при концентрациях препарата, которые способны подавлять рост в течение более длительного времени. Пересев восстановившейся культуры в свежий бульон с сульфонамидом показал, что оставшаяся бактериальная популяция стала резистентной к концентрациям СМЗ, при которых она ингибировалась первоначально, но сохранила чувствительность к более высоким концентрациям препарата.
В этом методе проявление бактерицидной активности может быть зарегистрировано только в том случае, если исходная величина, равная 106 клеток/мл, после контакта с препаратом уменьшится до менее чем 102 клеток/мл, т. е. гибель клеток должна составлять 99,99 %. При уменьшении исходной величины до 104 клеток/мл амоксициллин
легко снижал число бактериальных клеток до величины менее1 102 клеток/мл (99,0 %)• При этом величины МБК были того же порядка, что и МИК.