Затем зонд вытягивают и вводят в полость черепа, разрушая головной мозг.
Фиксация лягушки. Обычно лягушку фиксируют на пробковой дощечке, прикалывая к ней нижнюю челюсть, передние и задние конечности булавками (рис. 1). В зависимости от задачи опыта животное на . дощечку брюшком
кверху или книзу.
При отсутствии пробковой дощечки можно пользоваться деревянной. В ней надо просверлить отверстия соответственно местам фиксации лягушки и вставить в них корковые пробки.Загрузка. Пожалуйста, подождите...
При этом веревку просовывают между спиной собаки и столом и пропускают сверху другой передней конечности. Так достигаете?; полная иммобилизация животного, что способствует развитию у него сонного торможения.
Для наркоза пользуются маской и капельницей. Маску делают из проволочного каркаса, который обтягивают несколькими слоями марли. Капельницей может служить любой флакон с носиком. Накапав внутрь маски 10 капель наркоза (хлороформ + эфир), плотно надевают ее на нос собаки.
К электрокимографу прилагается инструкция о пользовании им.
Кимографы с быстро вращающимся барабаном (300— 600 мм в секунду) применяются лишь при исследовании некоторых вопросов нервно-мышечной физиологии
Для быстрого вращения барабана применяют пружинное устройство. Сверху на оси барабана укрепляют отросток, а на штативе кимографа — пусковую пружину с «собачкой» и курком. После завода пружину поднятием курка высвобождают, и она своим свободным концом давит на отросток, приводя в быстрое движение барабан.
В систему вводят под давлением воздух, вследствие чего баллончик раздувается.
Приборы для регистрации времени. Графическую регистрацию времени на кимографе производят при помощи электромагнитного отметчика или электромагнитного камертона.
Электромагнитный отметчик (рис. 16) состоит из маленького электромагнита, к якорю которого прикреплен записывающий рычажок. При помощи слабой пружинки якорь слегка оттянут от электромагнита.
позволяют точно определять частоту, силу и продолжительность раздражающего тока.
Примером такого прибора может служить электроимпульса-то р ЭИ-1, сконструированный заводом электромедицинской аппаратуры Московского совнархоза (рис. 23, А).
ЭИ-1 представляет собой источник импульсного (различной частоты и длительности) и гальванического (постоянного) токов. Он предназначен для проведения полного электродиагностического исследования возбудимости нервной и мышечных тканей: определения их возбудимости, лабильности и хронаксии.
Передвижение чечевицы по стержню маятника позволяет варьировать их частоту.
Ходики можно ввести в цепь электроотметчика для графической регистрации времени на кимографе, если время колебания маятника взять равным одной секунде.
Электромагнитный камертон (рис. 17) дает 100, 200 и более колебаний в секунду. Между его ножками укреплен электромагнит /. На одной из его ножек имеется платиновая пластинка 2, которая контактирует с концом винта 3.
Чтобы проамальгамиро-вать палочки, их предварительно опускают в крепкую соляную кислоту, а затем в ртуть, после чего промывают водой. На палочках находится по клемме для присоединения проводов от источника тока.
Каждый электрод удерживается специальным держателем, который позволяет придать ему любое положение. Электроды заряжаются непосредственно перед проведением опыта.
Хлорированные серебряные электроды готовят следующим образом.
Объектом исследования служит кровь участников занятия.
Задача. Эритроциты выполняют в организме функцию переноса кислорода. Количество их в крови имеет большое значение для нормального состояния организма. Определение количества эритроцитов в крови производят под микроскопом, пользуясь для этого специальными счетными камерами.
Задача работы — ознакомление с устройством счетной камеры, разведением крови и подсчетом эритроцитов.
Камеры следует держать в коробках и в сухом месте.
Приборы, материалы и объекты исследования. Игла для взятия крови, молочное стекло, предметные стекла, три пипетки, три стеклянные палочки, стандартные сыворотки I, II и III групп, вода, спирт, эфир, йодная настойка, вата, карандаш для записи на стекле.
Объектом исследования служит кровь участников занятия.
Задача. При переливании крови необходимо знать, к какой группе относится кровь донора и реципиента.
К аппарату прилагаются пипетка для взятия крови на 20 мм3 (метка «20»), обычная пипетка, стеклянная палочка и пробирка с 0,Ш раствором НС1.
Стандартный раствор в крайних пробирках готовится из 20 мм3 стандартной крови и 200 мм3 0,Ш раствора НС1. Под
влиянием соляной кислоты гемоглобин переходит в солянокислый гематин, имеющий коричневый цвет. Прибавлением воды объем раствора доводится до 2 мл. Этому объему соответствует в средней, открытой пробирке метка «100».
В этом случае воронку ввязывают в одну из легочных вен, а трубку — в аорту.
Движение створок клапанов сердца (по А. И. Смирнову). 1. Сердце помещают верхушкой вниз в кольцо (рис. 58). В верхушке проделывают отверстие (диаметр—0,5 см) и налагают вокруг него кисетный шов шпагатом. Через отверстие в левый желудочек вводят конец стеклянной трубки, согнутой под углом в 40—45°. Трубку фиксируют в толще миокарда кисетным швом; свободный конец ее соединяют при помощи резиновой трубки с водопроводным краном.
Удаляют пипеткой раствор адреналина из канюли и заполняют ее раствором Рингера. Выжидают некоторое время, чтобы сердце возвратилось к исходному ритму.
4. Удаляют из канюли раствор Рингера и вводят в нее раствор ацетилхолина (1:500 000 — 1:1 000 000). Через некоторое время отмечают замедление и ослабление, а иногда и полную остановку сердечных сокращений.
5. Заменяют в канюле раствор ацетилхолина раствором Рингера.
Заполняют канюлю, пользуясь пипеткой, физиологическим раствором и соединяют резиновой трубкой с манометром.
Трубку предварительно заполняют физиологическим раствором. Избегают попадания пузырьков воздуха в трубку.
3. Устанавливают электрокимограф или простой кимограф.
4. Берут для регистрации кровяного давления на кимографе водяной манометр с регистрирующей системой (диаметр трубки — 4—5 мм). При одном и том же давлении в сосуде разность столбов жидкости в обоих коленах будет значительно большей у водяного манометра, чем у ртутного.
Сфигмоманометр, стетоскоп или фонендоскоп.
Объектами исследования являются сами участники занятия.
Задача. Кровь в сосудах течет под давлением, которое зависит от ряда факторов. У здорового человека оно колеблется в незначительных пределах. При некоторых же заболеваниях давление может значительно повышаться (гипертония) или, наоборот, понижаться (гипотония). Поэтому определение его имеет большое практическое значение.
) и,, пустив в ход часовой механизм, записывают сфигмограмму.
4. Рассматривают сфигмограмму. На ней отмечают восходящее колено (анакрота), соответствующее систоле желудочка, нисходящее колено (катакрота), соответствующее диастоле, и дополнительный зубец на катакроте, носящий название ди-кротического подъема. Последний обусловлен тем, что при диастоле желудочка кровь устремляется к 1 сердцу, наталкивается на закрывшиеся полулунные клапаны и возвращается назад, вновь растягивая стенки аорты.
Объектами исследования служат участники занятия.
Задача. Плетизмографией называют запись объемного пульса, которую производят при помощи плетизмографа (рис. 74). Последний регистрирует изменения в объеме какой-либо части тела, обусловленные увеличением или уменьшением кровенаполнения.
Задачей работы является ознакомление с плетизмографом и получение плетизмограмм при различных воздействиях на организм человека.
Свободный конец канюли соединяют с тройником, к которому присоединяют водяной манометр и шприц. Вся система должна быть герметичной.
2. Отмечают манометром давление при спавшихся легких {нулевое давление).
3. Пользуясь шприцем, постепенно раздувают легкие воздухом, отмечая все время то давление, которое развивает при этом стремящаяся к спадению легочная ткань (эластическая тяга легких).
4. Вычерчивают кривую эластической тяги легких, откладывая по оси абсцисс вводимый объем воздуха в легкие (в миллилитрах), а по оси ординат — соответствующее давление в них.
Задача. При вдохе воздух поступает в легкие вследствие того, что давление в альвеолах уменьшается, так как объем грудной полости увеличивается и легкие, пассивно следуя за ее стенками, расширяются.
Во время выдоха воздух выходит из легких наружу, так как давление в альвеолах повышается в результате уменьшения объема грудной полости и спадающихся легких.
Расширение и спадение легких происходит за счет разности внутрилегочного и плеврального давления.
78).
2. Боковой отросток колокола соединяют с водяным манометром. Нижнее отверстие колокола затягивают мембраной, которую вырезают из резиновой перчатки. В центр мембраны вдавливают пробку, вокруг которой обвязывают резину. За концы обвязки мембрану можно оттягивать книзу.
Стеклянный колокол представляет СОбоЙ МОДеЛЬ груДНОЙ ряс_ 7а Модель грудной полости, полости, в которой роль диафрагмы выполняет резиновая
мембрана.
Вынув пробку из фистульной трубки, последнюю соединяют при помощи резиновой трубки с капсулой Марея.
2. На трудную клетку животного подвязывают пнеймограф или манжету от сфигмоманометра, которую соединяют резиновой трубкой со второй капсулой Марея.
3. Регистрирующие рычажки обеих капсул располагают на барабане кимографа по одной вертикали, друг под другом. Ниже ставят электроотметчик для регистрации времени.
К верхним концам обеих трубок манометра припаяны трубки, переходящие в полые стеклянные пробки. На эти пробки надевают сосудики яйцевидной формы, соединяя их с манометром. Внутри каждой пробки находится слегка изогнутая трубочка, которая служит для вливания в сосудики крови и химических реактивов, вытесняющих из нее 02 и С02. Краны, установленные на концах трубок манометра, служат для соединения его с атмосферным воздухом или с сосудиками яйцевидной формы.
Открыв капилляр и пустив в ход секундомер, дают слюне свободно вытекать из вискозиметра. Как только ее верхний уровень достигнет отметки, секундомер останавливают. Замечают время, необходимое для вытекания слюны .из капилляра; оно определяет вязкость. Чем больше последняя, тем продолжительнее время прохождения слюны через капиллярную трубку.
Сопоставляют вязкость слюны с вязкостью дистиллированной воды (1 мл ее проходит через капилляр в течение 5—7 секунд).
1 И. П. Павлов, Лекции по физиологии, изд. АН СССР, 1952, стр. 38.
2 Воронка Красногорского для собирания слюны из подчелюстной и подъязычной желез нами не описывается, так как удержание ее над папиллой Вартонова протока требует некоторого опыта.
2. Присасывают слизистую вокруг папиллы к наружной камере, создавая в ней вакуум. Для этого удаляют из камеры воздух при помощи шприца или резинового баллона, избегая появления болезненных ощущений у испытуемого.
3. Отмечают температуру воздуха в спирометре и барометрическое давление, например 18°С и 758 мм Hg.
4. Закончив запись, краны на гофрированных трубках поворачивают в первоначальное положение (на соединение с наружным воздухом). Снимают маску с испытуемого,
5. Снимают с барабана ленту, фиксируют и сушат ее.
Расчеты. 1. Определяют количество поглощенного кислорода (рис. 98). Для этого выбирают на полученной кривой участок с равномерным падением кривой и соединяют все его вершины прямой линией а.
5. Пользуясь таблицей химического состава и калорийности пищевых продуктов, составляют пищевой паек на три приема пищи. При этом, кроме калорийности, учитывают физиологическую ценность белка и необходимое, как указано выше, количество его и жира в рационе; принимают во внимание содержание в продуктах витаминов и солей.
ВЫДЕЛИТЕЛЬНЫЕ ПРОЦЕССЫ Работа 52. Отделение мочи (острый опыт)
Приборы, материалы и объекты исследования.
4. Отмечают расширение зрачка под влиянием адреналина и сужение при действии ацетилхолина.
Работа 54. Влияние питуитрина и адреналина на меланофоры лягушки
Приборы , материалы и объекты исследования. Микроскоп, стеклянная банка, белая бумага, дощечка с отверстиями, булавки, шприц на 2 мл, глазные ножницы, скальпель, пинцет с загнутыми концами, зажим Пеана, иглодержатель, игла глазная, шелк, марля, марлевые тампоны, растворы: питуитрина Р — 1 : 1000, адреналина 1 : 10 0001; 0,6% раствор NaCl, лягушки.
5. Сменяют раствор ацетилхолина на раствор Рингера, предварительно промыв им мышцу. Наблюдают медленно наступающее расслабление мышцы.
Калийная контрактура. 1. Приготовляют препарат портняжной мышцы лягушки (см. работу 55). Укрепляют его в стеклянном сосудике так, как и в предыдущем опыте. Верхний конец мышцы соединяют с рычажком Энгельмана.
2. Писчик рычажка приводят в соприкосновение с закопченной поверхностью медленно вращающегося барабана кимографа.
2. Измеряют высоту, на которую поднят груз. Для этого высоту кривой мышечного сокращения, записанную на кимографе, делят на соотношение плеч рычага. Вычисляют по формуле работу мышцы (в граммиллиметрах).
Результат опыта записывают в протокол.
3. Из-под рычажка удаляют подпорку. Теперь груз будет растягивать мышцу и в то время, когда она не сокращена. Повторяют опыты с раздражением мышцы при разных нагрузках.
Дощечка, булавки, ножницы большие и малые, два пинцета, стеклянный крючок, клемм-пинцет Диффенбаха, вата, физиологический раствор для холоднокровных, нитки, две индукционные катушки, две пары подвесных электродов, два электроключа, два аккумулятора, метроном-прерыватель, провода, кимограф с закопченным барабаном (медленно вращающимся), рычажок Энгельмана, грузик в 10 г, блок, штатив с держателем, лягушка.
Б. 1. Собирают установку для раздражения нерва прерывистым индукционным током. Для этого включают прерыватель индукционного аппарата в первичную цепь. Подбирают такую частоту перерывов, .которая вызывает тетаническое мышечное сокращение.
2. Определяют путем раздвигания катушек индукционного аппарата силу раздражения, при которой наблюдается субоптимальный тетанус.
3. Замыкают первичную цепь индукционного аппарата и производят короткое замыкание вторичной цепи.
Практическое указание. Для раздражения нерва можно воспользоваться электроимпульсатором ЭИ-1.
Работа 75. Пессимум силы и частоты
Приборы, материалы и объекты исследования. Миограф, гирька на 200 г, кимограф с закопченной лентой бумаги, два штатива, электромагнитный ртутный прерыватель, электромагнитный камертон на 200 колебаний в секунду, коммутатор (без креста), индукционный аппарат, электроды для раздражения нерва, провода, два аккумулятора, ножницы большие и глазные, два пинцета, зонд, стеклянный крючок, суровая нитка, вата, тарелка, 0,6% раствор NaCl, лягушка.
Ход опыта. 1. Лягушку обезглавливают и подвешивают за нижнюю челюсть на штативе. Выжидают 15—20 минут, когда исчезнет шок. Пускают в ход метроном.
2. Заднюю конечность лягушки опускают в стакан с 0,5% раствором H2SO4. Отмечают по числу ударов метронома время от момента погружения конечности до начала ее выдергивания (время рефлекса),
3. После отмывания с конечности кислоты водой повторяют измерение времени рефлекса, раздражая ту же конечность растворами H2SO4 в концентрации 0,1%, 0,2%, 1%'.
Задача. При наложении кристалла поваренной соли на поперечный разрез промежуточного мозга происходит увеличение времени спинномозгового рефлекса, который заключается в сгибании конечности, погруженной в раствор кислоты. Задержка рефлекса — следствие тормозящего влияния промежуточного мозга на рефлекторную деятельность спинного. Этим опытом в 1862 году И. М. С е ч е н о в открыл процесс торможения в центральной нервной системе.
Вдоль позвоночника разрезают кожу. Края раны расширяют. Лежащие по бокам позвоночника мышцы удаляют. Перерезают ножницами по обе стороны срединной линии дуги позвонков, начиная с передних и кончая задними. По мере образования костного лоскута его захватывают пинцетом и оттягивают как можно больше кверху. Этим облегчают разрушение последующих дуг позвонков. После вскрытия позвоночного канала спинной мозг освобождают от оболочек, удаляя их пинцетом.
Работа 90. Образование и торможение условного слюноотделительного рефлекса
Приборы, материалы и объекты исследования. Станок для собаки, воронка и градуированный стеклянный цилиндрик для собирания слюны, секундомер, настольный звонок, лист фанеры, менделеевская замазка, спиртовка, спички, полотенце, тарелка, банка с мясо-сухарным порошком, собака с хронической фистулой протока околоушной железы.
Задача.
При слишком сильных и слабых раздражениях величина К становится непостоянной.
Задача работы заключается в проверке закона.
Проверка закона Вебера—Фехнера при поднятии тяжести. 1. Испытуемый (с завязанными глазами) держит в руке подставку, согретую до температуры тела.
Экспериментатор помещает на нее груз весом 30 г, который постепенно увеличивает путем добавления гирек по 0,1 г до тех пор, пока испытуемый не заявит, что груз показался ему тяжелее.
Центры зрачков наших глаз находятся на некотором расстоянии друг от друга (60—65 мм), изображения предметов, получаемые на их сетчатках, несколько разнятся. Вследствие этого происходит раздражение некоторого количества диспаратных точек сетчатки, и получается впечатление телесности, или рельефности, предмета.
Задача работы заключается в проведении опытов, выясняющих особенности бинокулярного зрения.
Что нам может дать получение нового пенициллина, нового цефалоспорина, другого аминогликозида или другого рифамицина? Способна ли медицина использовать все то, что имеется в настоящее время? Поможет ли новая серия соединений при решении лечебных проблем?
Все эти вопросы неоднократно ставились на протяжении последних 15 лет, но пока можно сделать лишь один вывод: новые производные и аналоги будут использованы и даже помогут в решении указанной проблемы.
Е. М. Джоад очень часто начинал свои сообщения с такой фразы: «Все зависит от того, что мы под этим понимаем». Эта ситуация относится и к предмету, избранному для обсуждения на данной Истеровской школе. Поэтому прежде всего мы должны иметь рабочие определения таким понятиям, как сельское хозяйство, антибиоз, антибиотик и синергизм.
На факультете сельскохозяйственных наук Ноттингемского университета никогда не существовало строгого барьера между отдельными предметами.
В 50-е годы, когда производство антибиотиков сильно возросло, в сравнительных опытах in vitro с магнамицином (карбомицином) также был установлен потенциальный эффект синергизма (табл. 3.2) [250]. Интерес
Несмотря на обилие предложенных бактерицидных комбинаций, существуют следующие общие проблемы:
1) как установить различия между аддитивным и синергидный действием (см. гл. 7, 23 и 24);
2) как оценить комбинированное воздействие (комбинации двух, трех или более факторов, см.
coli, а через несколько месяцев после выздоровления у них обнаруживаются лишь единичные формы, несущие R-фактор. Тем не менее даже после длительной терапии в течение нескольких месяцев пациенты, как правило, представляют собой значительный резервуар Р+-форм. То же самое наблюдается у телят, выращиваемых в условиях постоянного контакта с антибиотиками. У них можно обнаружить от 40 до 60 % штаммов Е.
Все это позволило использовать ко-тримоксазол против большого числа инфекций, а именно при лечении респираторных заболеваний, исходя из активности комбинации против стрептококков, пневмококков и Haemophillus, при менингитах, благодаря активности против пневмококков, Haemophillus и Neisseria miningitidis. Ообенно широко и успешно эта комбинация используется при лечении инфекций мочевого тракта, она активна также против значительной части штаммов Е.
Они оказались исключительно активными против стафилококков и довольно успешно применяются при таких тяжелых стафилококковых инфекциях, как остеомиелиты. Кроме того, виргиниямицин применяют как добавку к корму.
Помимо синергидных комбинаций препаратов, которые нашли непосредственное применение в медицине, остается ряд комбинаций, проходящих экспериментальную проверку. Применение комбинированных препаратов является особенно важным, хотя до сих пор оно получило лишь ограниченное распространение в терапии.
Основной недостаток такого лечения состоит в том, что не все выжившие после контакта с пенициллином формы находятся в виде сферопластов. Очевидно, некоторые из них сохраняют морфологически интактную форму и поэтому нечувствительны к эритромицину. Более того, соотношение выживших микроорганизмов в виде сферопластов и интактных форм неодинаково в разных случаях
Терапевтическое применение комбинаций антибиотиков для получения синергидного действия или других целей нелья отделить от тех сложностей, которые могут возникнуть при взаимодействии компонентов комбинации.
Взаимное усиление активности между 2,4-диаминопиримидинами и сульфонамидами было также показано Люксом [67] при кокцидиозе у птиц; инфекцию вызывал Eimeria tenella, а усиление активности отмечено между пириметамином и сульфахиноксалином или сульфаниламидом.
Хотя синергидное действие против бактерий вначале было установлено in vitro между сульфатиазолом, синтетическими птеринами и 2, 4-диаминопиримидопиразинами [30], однако до появления работы Хитчингса [53] в 1951 г.
Кроме того, при высеве микроорганизмов из разбавленной суспензии на агаризованную среду, содержащую ТМП, отмечается лишь незначительное изменение их чувствительности к ТМП даже после 25 пересевов, тогда как при высеве микроорганизмов из концентрированной суспензии в бульон, содержащий возрастающее количество этого препарата, было установлено уменьшение чувствительности микробов в 32—124 раза и более всего лишь после пяти пересевов.
Он оказался неактивным в присутствии сульфонамида, тогда как другой фермент в этом случае был активен [97].
Влияние сульфонамида на активность дигидроптероатсинтетазы таких штаммов характеризовалось количественными различиями, поэтому можно было ожидать, что ТМП-чувствительность многих сульфонамидрезистентных штаммов будет возрастать в присутствии сульфонамида из-за уменьшения количества субстрата, конкурирующего с ТМП.
В условиях in vitro ТМП :в расчете на единицу массы в 20 раз активнее СМЗ, однако величина ЕД50 для мышей у ТМП обычно выше, чем у СМЗ. Это очевидное противоречие можно, вероятно, объяснить очень коротким временем 50 %-ного вывода ТМП из организма мышей: оно равно всего 1 ч и в несколько раз быстрее, чем у СМЗ. .;
Считается, что предполагаемое преимущество применения ТМП с сульфонамидом состоит в том, что ТМП не увеличивает появления нежелательных побочных реакций.
Таким образом, по величине времени, необходимого для восстановления плотности культуры, можно было установить любую разницу в антибактериальной активности между комбинацией и отдельными препаратами. Полученные результаты приведены в таблице 6.2.
При концентрациях препаратов, превышающих значения МИК, присутствие избытка СМЗ не приводило к увеличению времени восстановления плотности культуры после контакта с одним ТМП, более того, при суб-МИК-концентрациях было установлено небольшое дополнительное подавление роста.
Тем не менее лучшим средством против стрептококковой инфекции до сих пор остается сочетание пенициллина с аминогликозидом.
Тяжелые инфекции, вызываемые грамотрицательными бациллами, представляют сейчас основную проблему в клинической практике. Особенно трудно поддаются лечению заболевания, вызванные Pseudomonas aeruginosa, из-за резистентности этого своеобразного возбудителя к большинству антибиотиков.